将柑橘叶的裂解提取液注入试管，经吸附杂质后提取病原微生物DNA，再将DNA关键参数导入计算机进行分析筛选……在位于我国重要脐橙产区江西赣州的赣南师范大学生命科学学院（脐橙学院）实验室内，“环环相鉴”大学生科创团队负责人王琢冰正带领成员们操作着试剂实验平台。

裂解液配比的优化是充分释放柑橘叶片中目标DNA的关键步骤。“我们将预制的柑橘裂解液与团队自主研发的特异性双端修饰引物结合，通过信号放大技术，可以实现百倍级扩增，进而引发显著的试剂显色反应，由此快速判定该株柑橘树是否感染黄龙病。”王琢冰介绍道。为确保检测产品性能最优，要求引物在常温环境下对柑橘黄龙病菌能产生快速且高度特异的反应，这对引物的设计筛选及裂解液配方工艺提出了极高要求。

王琢冰团队所攻坚的柑橘黄龙病，是世界柑橘产业的毁灭性病害，素有柑橘“头号杀手”之称，已被我国列为重大植物检疫性病害。“黄龙病目前无法根治。病树在早期感染阶段无明显症状，果农难以凭肉眼识别。同时这种病害传染性很强，一旦发现树苗感染，往往只能连片砍除，给果农造成严重经济损失。”王琢冰表示。自2021年起，她深入江西省65个乡镇进行实地调研，了解到柑橘产业对于黄龙病防控的迫切需求，决心投身这方面的研究。

历经四年攻关，王琢冰团队在大量文献研究和行业调研的基础上，构建了以胶体金法为框架的柑橘黄龙病快速检测体系，成功研发出拥有自主知识产权的黄龙病菌DNA核酸提取专用裂解液及配套引物组合。此外，她还带着团队成员长期深入企业果园生产一线，与技术人员共同工作，发现柑橘实际种植问题背后的科学和技术难题。

“团队成员深入企业驻点，开展协同技术攻关，是我们实现技术突破的关键。”王琢冰强调。例如，针对传统实验室检测方法需在95℃水浴加热环境下才能扩增病菌DNA，而田间检测条件无法满足这一要求的技术难题，团队成员肖梦怡等三人被派驻生产一线。他们在果园驻扎半年，通过对高灵敏度环介导等温扩增（LAMP）技术的持续优化，成功攻克了这一制约田间应用的瓶颈。

经过四年不懈努力，团队研发了全国首款适用于田间即时检测的柑橘黄龙病检测试剂盒方案，突破了田间无法快速确诊黄龙病的壁垒，攻克了传统实验室检测费时、费钱、费力的难题。该试剂盒核心技术具有完全自主知识产权，经严格验证，其检测准确率高达94.75%，达到国际领先水平。

“我们的产品真正从果农实际需求出发，实现绿色高效检测体系。在早期即可准确检测病树，避免后期盲目喷洒农药，保障柑橘行业绿色、健康、可持续发展。”王琢冰自豪地介绍。近年来，“环环相鉴”团队已联合多家企业，积极下乡普及柑橘黄龙病防控知识，让技术成果普惠广大果农。

目前，王琢冰团队已经汇聚教师和硕博研究生共15人。未来，他们将聚焦第三代多病原联检试剂盒和“快速检测-早期预警-生物防治”一体化集成系统开展研究。王琢冰表示，团队将持续开展产学研用协同创新，在农业生物安全、农作物重大病虫害监测等前沿技术领域持续发力，为巩固和提升我国农业科技竞争优势贡献力量。